提高粳稻成熟胚抗性愈伤再生频率的研究

为提高粳稻抗性愈伤分化率和遗传转化率,以农杆菌介导遗传转化得到的水稻成熟胚抗性愈伤(Hyg)为材料,研究了影响粳稻成熟胚抗性愈伤组织再生频率的因素。结果表明分化培养基添加0.5～25 mg.L-1的CuSO4.5H2O,增加分化培养基中的琼脂浓度,分化前对抗性愈伤进行高渗处理,采用6-BA和KT两步分化法和干燥除菌法均能提高抗性愈伤组织的分化率。     

纤维素降解真菌的筛选与鉴定

通过对采集于农田的土壤及秦岭原始森林中的腐木样本进行微生物富集培养,以微晶纤维素为唯一碳源进行筛选、分离和纯化,获得一株可利用微晶纤维素的真菌C006,依据ITS rDNA测序及聚类分析并结合形态学特征,鉴定为深绿木霉(Trichoderma atroviride).经液体发酵、固体平板培养及刚果红染色,进一步确认C006菌株对微晶纤维素有较强的降解能力.同时,还发现C006菌株在利用微晶纤维素时产生大量的酸性物质.     

西洋参总皂苷(PQS)对鼠模拟缺血-再灌注心肌细胞Bcl-2及Cyt c表达的影响

本文探讨西洋参总皂苷(PQS)对缺血再灌注(I/R)心肌细胞凋亡的抑制机制。试验采用原代培养乳鼠心肌细胞,模拟心肌缺血-再灌注损伤模型,并给予PQS干预。应用RT-PCR、Westernblot方法和免疫荧光方法观察Bcl-2的表达,并检测细胞色素c(Cytc)的表达。结果I/R组与对照组比较Bcl-2和Cyt c的表达明显增加(P<0.05);PQS干预组较I/R组Bcl-2的表达增加,而Cyt c表达减少(P<0.05)。结论得出PQS可上调心肌细胞Bcl-2并减少Cyt c表达,从而抑制心肌细胞凋亡。     

干酪乳杆菌表面展示IBDV VP2蛋白

旨在利用pLA载体将IBDV B87株VP2蛋白展示在干酪乳杆菌表面。首先通过RT-PCR扩增VP2基因片段,测序鉴定正确后,将目的片段构建在pLA穿梭质粒上,命名为pLA-VP2,然后将重组质粒电转化到干酪乳杆菌中,构建IBDV重组干酪乳杆菌。应用SDS-PAGE检测重组菌表达目的蛋白VP2,得到约90 kDa的融合蛋白,与预期结果相符。Western blot结果显示VP2蛋白可以与抗IBDV多抗血清发生特异性反应,具有很好反应原性。流式细胞仪的散射光检测器可以捕捉到pLA-VP2重组菌菌体表面的荧光,且重组菌荧光强度强于pLA菌对照组,应用正态分布函数计算pgsA-VP2融合蛋白的表达效率,约为80%。结果表明IBDV VP2蛋白成功展示在干酪乳杆菌表面。     

总状毛霉酶水解大豆异黄酮苷条件的优化

利用总状毛霉进行生物转化,采用单因素和中心组合试验设计对转化大豆异黄酮苷水解条件进行研究。通过响应面法对水解后游离苷元浓度、时间、温度、酶量、pH值之间的关系建立数学模型,获得了最佳水解条件:水解时间3.59 h,pH6.1,酶量23 mL,水解温度46℃。经验证试验与预测值接近,说明该模型有很好的预测能力。     

苏打盐碱胁迫对甜高粱种子萌发的影响及品种耐性综合评价

将NaHCO3和Na2CO3按5:1混合,在不同盐碱浓度处理下对7个不同甜高粱品种的发芽势、发芽率、发芽指数、相对活力指数、平均根长、平均发芽率和盐害率进行比较研究,并采用隶属函数法对各品种耐性进行评价.结果表明:7个甜高粱种子耐盐碱性由强到弱的综合排序为:MN 3739＞ M-81 E＞贝利＞Rio＞ ES 725＞ 3222＞雷伊.     

农作物病原卵菌基因组数据库资源概述

卵菌包含许多严重危害农作物的病原菌,目前已经积累了一些重要病原卵菌的基因组数据,这些数据资源对于卵菌的功能基因组研究具有重要意义。本文对农作物病原卵菌基因组数据库资源及数据库检索方法做一概述,以期促进卵菌基因组数据资源的利用,加快其功能基因学研究。     

重组PEDV-S干酪乳杆菌的构建及其表达

猪流行性腹泻病毒(PEDV)可引起猪的呕吐、腹泻及脱水。通过将其S1片段逆转录连接到干酪乳杆菌表面表达载体p LA上,使其表达蛋白,为进一步研究其特性及免疫原性奠定基础。采用TRIzol的方法从PEDV中提取RNA为模板,通过RT-PCR技术获得该病毒的S1片段,然后将该基因连接到载体p LA中并表达。重组菌经过培养表达之后,利用Western blot检测融合蛋白大小约为81 k Da;重组蛋白可被兔源的抗Pgs A血清和鼠源的抗PEDV血清所识别。表明重组干酪乳杆菌成功的表达了融合蛋白。     

朊病毒病生物标记microRNA-142-3p可视化快速检测

为了更快捷、方便的检测朊病毒病,根据已有报道确定micro RNA-144-3p作为朊病毒病的生物标记,通过mi RBase数据库公布的micro RNA-142-3p的核酸序列,设计特异性标记有生物素的俘获探针和标记有FAM的检测探针,从而建立了纳米金偶联核酸试纸条的高效,快捷,可视化检测方法。结果表明:该检测方法具有良好的特异性和较高的灵敏度(0.005 nmol·L-1)。该检测试纸条的建立在朊病毒病预防,控制,诊断过程中具有一定实际意义。     

水稻抑制差减杂交技术中叶片总RNA提取方法的探讨

为建立水稻抑制差减杂交技术中叶片总RNA最佳的提取方法,以5叶期水稻品种合江19为提取总RNA的材料,对Trizol法和两种改良Trizol法提取的水稻叶片总RNA纯度和完整性进行了比较研究。基因定量仪检测结果表明,Trizol法、改良Trizol法Ⅰ和改良Trizol法Ⅱ提取的RNAOD（260／280）分别为1．529、1．755和1．991;琼脂糖凝胶电泳检测结果显示,改良Trizol法Ⅱ提取的RNA具有28s、18s和5s3条清晰的条带,且无降解,而其他两种方法提取的RNA质量较差,均有降解。该研究结果说明改良Trizol法Ⅱ提取的RNA完整性好和纯度较高,该方法优于Trizol法。